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印染廢水是我國主要的工業污染水之一,內含多種有毒難降解的染料.目前,有關該類廢水的處理方法有物理化學方法和生物方法.其中生物法由于其高效、簡易和脫色率高而受到重視.國內外學者對染料的微生物脫色降解進行了一系列研究[1-5].這些研究表明,利用微生物處理印染廢水是一條可行的途徑.球衣菌是活性污泥中一類重要的絲狀菌,通常分布于小溪、湖泊、泉水等淡水環境和污水處理系統及輸水管道中[6].目前,球衣菌已廣泛應用于污水處理、生產生物可降解材料PHB、生物監測、富集重金屬等方面[7-10].但有關球衣菌對染料廢水的脫色研究尚未見相關報道.本文用富集、平板劃線等方法從福州祥坂污水處理廠的活性污泥中分離到一株球衣菌,并就其對染料的耐受性及脫色特性進行了研究,旨在為進一步開展此類廢水的工業化處理提供優良的微生物菌源及相關理論依據.1·材料與方法1.1菌種來源和染料菌種來源:福州祥坂污水處理廠曝氣池各點活性污泥混合液20份.染料:直接耐曬黑、酸性黑ATT、堿性棕、堿性橙、堿性品藍、孔雀石綠,均為工業用產品.其中直接耐曬黑、酸性黑ATT、堿性棕、堿性橙等為偶氮染料,酸性黑ATT最大吸收波長為596.5nm.1.2培養基1.2.1富集培養基尿素培養基(g/L):尿素0.5,葡萄糖1.0,MgSO4·7H2O0.05,K2HPO40.1,pH7.0.1.2.2分離純化培養基CGY培養基(g/L):蛋白胨5.0,酵母膏1.0,甘油10.0,瓊脂20,pH7.0.Stoke培養基(g/L):葡萄糖1.0,蛋白胨1.0,MgSO4·7H2O0.2,CaCl20.05,FeCl30.01,瓊脂20,pH7.0.1.2.3耐受性實驗培養基同Stoke培養基,不同的是加入各種不同濃度不同種類的染料.1.2.4脫色實驗培養基同CGY培養基,不同的是加入酸性黑ATT染料,質

量濃度為0.1g/L.1.3球衣菌的富集、分離及初步鑒定1.3.1富集培養分別吸取各點活性污泥混合液0.5mL,接入裝有4.5mL富集培養基的試管中,28℃靜止培養24~48h,如發現有半透明絮狀小團塊飄浮于液體中,小心用接種針先挑取出少量,鏡檢結果表明為球衣菌時,即可進行分離.1.3.2分離培養將富集培養液內出現的絮狀團塊,用接種針挑出,先在無菌水中洗滌一次,然后在已制好的Stoke瓊脂平板上進行劃線分離,28℃培養24h后,對光仔細檢查,如在劃線條的兩側邊緣有絲狀體緊貼平板向外伸出,可用低倍鏡進行初步鏡檢.如為球衣菌,應及時挑取離中間雜菌較遠的絲狀體在新的平板上進行劃線,這樣經過3~4次重復劃線分離,即可提取出純化的菌株.1.3.3菌種鑒定參照文獻[6],對該菌株的細胞形態、培養特征和生理生化特征進行初步鑒定.1.4菌株對染料的耐受性研究將分離到的菌株接種于新鮮的CGY斜面,28℃培養3d后,用無菌水稀釋制備成10-4,10-5,10-6菌懸液涂布于各種耐受性實驗培養基固體平板上,于28℃下培養2d,觀察菌株在各種染料及其相應各種濃度中的生長情況及脫色效果.