儀器:722G可見分光光度計(上海精密科學儀器有限公司)、電熱恒溫水浴鍋(上海醫療機械五廠)、二兩裝高速中藥粉碎機LG-02(瑞安市百信藥機器械廠)、電子天平JA2003N(上海菁海儀器有限公司)、馬頭牌JYT-2架盤藥物天平(上海光正醫療儀器有限公司)、循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)
1.2方法
將商品茶葉打成粉末,浸泡2h,按照一定比例分別加入至100ml蒸餾水中,升溫并攪拌,一定時間后靜置、冷卻、過濾,濾液用于吸光度測試。
2.1茶葉色素吸收光譜曲線
將茶葉色素稀釋液用可見分光光度計掃描,制得曲線,如下:
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確定紅茶最大吸收波長為672nm。同樣的方法,測定綠茶最大吸收波長為672nm。這也驗證了紅茶跟綠茶最大的差別不是使用的茶種不同,而在于茶葉是否經過發酵的程序,也就是說,茶葉的加工工序不會影響茶葉色素顏色的穩定性。本實驗選用綠茶為試驗樣品做穩定性測試,不再討論兩者之間差異。
2.2最佳萃取級數的測定
考慮到植物染料的利用率,為確定最佳提取工藝流程,對茶葉再次進行1次、2次……多次提取,觀察吸光度值。取5g茶葉,加入100ml蒸餾水,放入100℃水浴中煮沸50min,冷卻至室溫,過濾為第1次萃取液,放入100ml容量瓶定容,用分光光度計測吸光度A;濾渣再加入100ml蒸餾水,重復以上步驟,過濾為第2次萃取液;以此類推,分別測量萃取液的吸光度A,A值越大,則色素越多。測試結果見表1。
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由表1可知,茶葉萃取液從第4次開始,A值下降很大,即A值已很小,說明此時茶葉中色素含量已很少,而繼續增加提取次數對色素得率的影響不明顯,故茶葉萃取3次即可。
2.3萃取實驗
2.3.1正交試驗
表2萃取工藝正交試驗
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注:A—固液比;B—溫度;C—時間;D—pH
將影響萃取工藝的主要因素設計成正交試驗表,依照其進行試驗,實驗結果見表2。
由此表可以看出,上述因素的影響效果是:溫度(℃)>時間(min)>固液比>pH,最佳工藝A2B3C2D2,即固液比1:20,在沸煮(100℃)的條件下60min中性溶液中提取。下面對單因素分析,進行工藝優化。
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