4纖維素酶的固定化研究
目前,纖維素酶的價格比較昂貴,若將其固定化,進行重復(fù)使用便可降低生產(chǎn)成本。近年來,在纖維素酶的固定化研究上已取得了一定的進展,王玫等(2006)利用氨水作沉淀劑,用共沉淀法制備了磁性納米顆粒,并以此為載體,制備了固定化纖維素酶,結(jié)果表明,磁性固定化酶有良好的熱穩(wěn)定性和貯存穩(wěn)定性,為纖維素的利用提供了一條新思路。楊國營等(2004)報道,使用雙功能試劑戊二醛作交聯(lián)劑,將纖維素酶固定于脫乙酰度93.66的殼聚糖上,實驗發(fā)現(xiàn):脫乙酰度高的殼聚糖所用戊二醛的質(zhì)量濃度較高,且固定化酶量較高;固定化酶的熱穩(wěn)定性比原酶高,與底物親和力增加;最適pH值向酸性方向移動L2。潘麗軍等(2006)合成了淀粉接枝丙烯腈、丙烯酰胺兩親性高分子化合物,并以此為載體,共價偶聯(lián)固定纖維素酶,結(jié)果表明:最適溫度為5O℃,最適pH值為6.6,熱穩(wěn)定性、重復(fù)使用穩(wěn)定
性和儲存穩(wěn)定性均有明顯提高[2。據(jù)柴梅等(2007)報道,選用國內(nèi)固定化酶方面研究較少的EudragitL-100為載體,采用物理吸附法制備出具有可溶一不可溶性質(zhì)的固定化纖維素酶。固定化酶的溶解度變化的條件是:pH≥5.0時,呈可溶性,pHi4.0時,呈不可溶性。固定化酶的穩(wěn)定性較好,重復(fù)利用4次后,酶活力保留值在659,6以上。以2的濾紙為底物(15FPU/g底物),固定化酶水解反應(yīng)的效果比游離酶好。
5結(jié)束語
當(dāng)前,新能源、新食品資源的開發(fā)是世界各國都在著重研究的重大課題,在這類研究中,纖維素科學(xué)、纖維素降解機理和纖維素酶的研究成為其研究的主要組成部分。但是離大規(guī)模地對纖維素進行利用還相差甚遠,故仍然需要尋找新的產(chǎn)纖維素酶菌株或進一步選育高產(chǎn)菌株。多數(shù)纖維素降解菌株均為普通培養(yǎng)基獲得,一些厭氧、極端環(huán)境微生物并未引起足夠重視,它們所具有的一些降解基因也許是非常特別的。原生質(zhì)體融合技術(shù)可打破物種間細胞不能相互融合的障礙,是獲取具有全纖維素酶高產(chǎn)菌株的理想育種途徑。其次,可通過篩選或誘變產(chǎn)生高產(chǎn)菌株,并利用基因工程以及生產(chǎn)工藝的改進來高效地生產(chǎn)酶活高、適應(yīng)性強的纖維素酶。最后,運用蛋白質(zhì)工程技術(shù)可增強纖維素酶的抗逆性。總之,纖維素酶必將在人們的生活中發(fā)揮出其所具有的巨大潛力和作用。
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