2產纖維素酶菌株的篩選與保藏
2．1產纖維素酶真菌的篩選
產纖維素酶的真菌有黑曲霉、血紅栓菌、臥孔屬、疣孢漆斑菌QM46o、繩狀青霉、變幻青霉、變色多空霉、乳齒耙菌、腐皮鐮孢、綠色木霉、里氏木霉、康氏木霉、嗜熱毛殼菌QM9381和嗜熱子囊菌QM9383等；絲狀真菌產生的纖維素酶一般在酸性或中性偏酸性條件下水解纖維素底物。真菌纖維素酶通常是胞外酶，酶被分泌到培養基中，用過濾和離心等方法就可較容易地得到無細胞酶制品[7]。王家林等(1996)采用了紫外線、特定電磁波輻射、線性加速器，亞硝基胍等物理、化學的誘變方法，獲得了高產菌株NT15一H、NT15一H1、XT-15H、XT-15H1。其中木霉NT一15H固體培養活力經檢測表明，濾紙活力為3670U／g，C1一酶活力24460U／g，Cx一酶活力1800U／g，已達到國際先進水平，此菌種在工廠化生產中性能穩定。
張苓花等(1998)采用康氏木霉W-925，J一931，經過濃度為29／5硫酸二乙酯和紫外線(15W、30cm、2rain)復合誘變后，得到了產酶活性高的wu一932菌種，該菌種CMC糖化力達到2975，濾紙糖酶活性為531，比出發菌W-925分別提高了100和81。王成書等(1997)采用里氏木霉A3進行紫外線和亞硝基胍復合誘變后，將處理過的孢子接種于纖維雙層平板上，3O℃培養5～8d，15℃放置7～10d，挑選透明圈直徑和菌落直徑比較大的單菌落進行三角瓶固態發酵再篩選，得到了產纖維素酶活力很高的里氏木霉91—3菌株。
2．2產纖維素酶細菌的篩選
由細菌所產生的纖維素酶一般最適pH中性至偏堿性，由于這類酶制劑對天然纖維素的水解作用較弱，較長期以來沒有得到足夠的重視。近十幾年來，隨著中性纖維素酶和堿性纖維素酶在棉織品水洗整理工藝及洗滌劑工業中的成功應用，細菌纖維素酶制劑已顯示出良好的使用性能和巨大的經濟價值。唐仕榮等(2006)報道，以產纖維素酶細菌LBT-3．6為出發菌株，經紫外、微波先后誘變，選育得一株高產突變株WB-2，濾紙酶活力比出發菌株提高了202．7。經過培養條件優化后，以麩皮為碳源，最適濃度為50L，(NH4)。PO44L，蛋白胨1g／L，添加0．49，6Naa和0．2％吐溫8O，濾紙酶活力達到12．35U／ml。王銳萍等(2006)報道，以產纖維素酶芽孢桿菌JJOB為出發菌株，進行了紫外線和誘變處理，采用透明圈法初篩和搖瓶培養復篩，獲得2株高產纖維素酶的突變株HS-)O1和HS-T002。與出發菌株相比，經紫外線誘變處理的HS-。O1突變株產酶活力提高了1．9倍，用HN誘變處理的HS-T002突變株產酶活力提高了2倍。
2．3產纖維素酶菌種的保藏
產纖維素酶菌種易退化，退化后其產酶力明顯降低。為了避免菌種退化，張苓花等(1998)報道，采用砂土管保藏菌種。即將過篩洗凈的砂子與土以3：2的比例混合分裝在試管內，用1kg／CITI2壓力滅菌30min共三次，將欲保存的斜面菌種制備成100mL孢子懸浮液，每個砂土管注入0．5mL，搖勻，放入盛有無水CaCL2。真空干燥器內保存。經測定，在所測的121d內，酶的活性基本不變；酶活性下降5O的時間，由常規方法的60d延長至160d，明顯地減緩了菌種退化速度。
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