試驗(yàn)成立條件﹕轉(zhuǎn)印在標(biāo)準(zhǔn)布上試驗(yàn)菌數(shù)達(dá)到 １﹒０×１０６ 個(gè)以上，增殖值（±０﹒５ 以內(nèi)）Ｆ＝Ｍｃ－ Ｍｄ﹒Ｍｄ 為剛轉(zhuǎn)印標(biāo)準(zhǔn)布上的生菌數(shù)對(duì)數(shù)值﹔Ｍｃ 為在試驗(yàn)布上培養(yǎng) １-４ｈ 后生菌數(shù)的對(duì)數(shù)值﹒
２ ＡＴＰ（生物發(fā)光法）測(cè)定細(xì)菌數(shù)
紡織品上細(xì)菌含量測(cè)定已沿用 １００ 多年，采用將試樣上沖洗菌液，在瓊脂上培養(yǎng)?（３７±１）℃，（２４￣４８）ｈ后，再測(cè)定數(shù)量，操作繁雜且費(fèi)時(shí)，精度不高﹔而用 ＡＴＰ（生物發(fā)光法）測(cè)定，省時(shí)、省力，在技術(shù)上是一大進(jìn)步﹒
利用熒光蟲的熒光素 進(jìn)行高靈敏度 ＡＴＰ 測(cè)定的原理早在 １９５０ 年已發(fā)現(xiàn)﹒近年來(lái)用基因重組技術(shù)完成了無(wú)性繁殖的微生物生產(chǎn)蟲熒光素 ，解決了蟲熒光素 性能穩(wěn)定性，而基因改性解決了“ 耐熱性”、“ 耐表面活性劑”等問題﹔去除樣本中游離 ＡＴＰ，從膜過濾改為 分解技術(shù)，解決了游離 ＡＴＰ 問題﹔采用低噪音、感度達(dá) １０１３Ｍ、性能穩(wěn)定的光電倍增管光量測(cè)定儀元件，才使它成為許多領(lǐng)域中一項(xiàng)樂意采用的新技術(shù)﹒
日本纖維制品新功能評(píng)估協(xié)議會(huì)（ＪＡＥＥＴ）已將ＡＴＰ 測(cè)定法作為日本紡織品的抗菌性試驗(yàn)法抗菌效果（ＪＩＳ Ｌ １０９２﹕２００２）中增加了一個(gè)新的細(xì)菌數(shù)測(cè)定方法，同時(shí)也向 ＩＳＯ 推薦采用﹒
ＡＴＰ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，三磷酸腺 ）是生物體內(nèi)一種貯藏能源的化學(xué)物質(zhì)，肌肉運(yùn)動(dòng)能源提供者，也是生物體產(chǎn)生各種物質(zhì)的 反應(yīng)能源﹒因此，有生命活動(dòng)的地方一定有 ＡＴＰ 存在﹔反之，存在 ＡＴＰ 表示有生物存在的可能性﹒細(xì)菌細(xì)胞中也含有固定的 ＡＴＰ量，同一種細(xì)菌處于對(duì)數(shù)繁殖期和穩(wěn)定期其 ＡＴＰ 含量不同﹒細(xì)菌一旦死亡，ＡＴＰ 會(huì)被細(xì)胞內(nèi)的分解 立刻分解殆盡﹒由此可測(cè)得樣本中 ＡＴＰ 濃度用它再除以各菌種不同狀態(tài)下每一個(gè)細(xì)菌的 ＡＴＰ 數(shù)量就可求得樣本中的活菌數(shù)﹒利用此原理可以方便測(cè)定制備試驗(yàn)菌液以及培養(yǎng)后的活菌數(shù)﹒
ＡＴＰ 生物化學(xué)發(fā)光測(cè)定操作概要﹕（１）在 ＡＴＰ 試驗(yàn)菌液（或接種菌液）以及沖洗的菌液中添加 Ａｐｙｒａｓｅ （腺 三磷酸雙磷酸 ）與腺 胱氨 ，利用 分解將菌體外的游離 ＡＴＰ 去除﹔（２）在去除游離 ＡＴＰ 菌液中加入 ＡＴＰ 萃取劑進(jìn)行萃取﹔（３）萃取后，加入由蟲熒光素和 Ｄ－ 蟲熒光素組成的發(fā)光試劑，然后用光電倍增管測(cè)定由 ＡＴＰ 和發(fā)光試劑反應(yīng)發(fā)出的熒光光量，其反應(yīng)式如下﹕
由發(fā)光量可求得 ＡＴＰ 濃度（ｍｏｌ／Ｌ），再用 ＡＴＰ 濃度除以如表 1 所示不同菌種在不同狀態(tài)下每一個(gè)細(xì)菌的 ＡＴＰ 量，即為樣本中活菌濃度（個(gè)／ｍＬ）﹒
表 1 各菌種每一細(xì)胞 ＡＴＰ 量
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