CMC粘度法是纖維素酶活力檢測(cè)的方法之一,作者用它測(cè)定了一批市售纖維素酶的活力,又分別用SBDI-A和Cellusoft L酶進(jìn)行了多項(xiàng)工藝測(cè)試,在此基礎(chǔ)上提出;在織物處理過(guò)程中酶對(duì)纖維素纖維有較多的吸著,隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng),酶的作用力逐漸減弱直至完全衰竭,并認(rèn)為CMC粘度法是一個(gè)簡(jiǎn)易可靠值得推薦的活力定量檢測(cè)方法,它可以用來(lái)評(píng)價(jià)酶的力份,測(cè)定酶的儲(chǔ)存穩(wěn)性定,用以篩選酶的增效劑和抑制劑,可以用來(lái)測(cè)定酶處理反應(yīng),為制訂工藝配方提供科學(xué)依據(jù)。
關(guān)鍵詞 纖維素酶 織物酶處理 分析測(cè)試方法
1.織物處理用纖維素酶及其活力測(cè)試研究
1.1 酶的活力測(cè)試方法現(xiàn)狀:
纖維素酶是由霉菌等培養(yǎng)得到的一個(gè)自然的多組份混合物,它的生物催化作用可以使纖維素纖維發(fā)生水解,有效地控制水解速度和水解率可以得到纖維素纖維織物的不同處理要求,纖維素酶對(duì)纖維素纖維的作用分四個(gè)程序;滲入,內(nèi)切,外切,糖化。
滲入決定于酶的分子量大小和纖維的內(nèi)表面可及度,內(nèi)切(在任意部位把纖維素苷鍵切斷)主要決定于組份中Cx酶的活力,外切(在纖維素的一端順序切下一個(gè)個(gè)雙糖)主要決定于C1酶的活力,糖化決定于把多糖轉(zhuǎn)化為單糖的葡萄糖酶Co的活力。多種組分的各自活力和協(xié)調(diào)構(gòu)成了單位時(shí)間內(nèi)纖維素纖維的降解糖化量,酶的活力測(cè)定對(duì)織物酶處理工藝設(shè)計(jì)有重要意義。
酶的活力測(cè)定,有稱作催化活力測(cè)定,測(cè)定方法有;濾紙崩潰法,總糖比色法,粘度法等。濾紙崩潰法屬于定性檢測(cè),總糖比色法重點(diǎn)反映C1與Co的協(xié)調(diào)作用,粘度法重點(diǎn)反映Cx與C1的協(xié)調(diào)作用,兩者都可以用作定量測(cè)定。至今活力測(cè)定尚未有統(tǒng)一的方法,表示活力大小的計(jì)量單位更是多種多樣,丹麥NOVODISK(諾和諾得公司)早期采用總糖比色法(AF187.2/1-GB82-08-10)一分鐘水解產(chǎn)生1μmol葡萄糖稱為一個(gè)NCU活力單位(NCU=NOVOCellulase Unit)。后來(lái)又采用粘度法(AF275/1-GB1989-02-03)用一種活力為880EGU的內(nèi)切葡聚糖酶,以其作用于CMC的粘度曲線為對(duì)比標(biāo)準(zhǔn),測(cè)得的對(duì)應(yīng)值以EGU/克作為一個(gè)內(nèi)切酶活力單位(EGU=EndoGlucase Unit)。
紡織染整行業(yè)應(yīng)用酶處理技術(shù)已有多年,但還沒(méi)有建立起酶的活力測(cè)定方法,無(wú)法檢出酶商品的好壞,不能檢查酶的儲(chǔ)存穩(wěn)定性,失去了制訂酶處理工藝配方的科學(xué)依據(jù)。對(duì)于使用廠來(lái)說(shuō),迫切需要有一個(gè)簡(jiǎn)便的,統(tǒng)一的,實(shí)用的工藝檢測(cè)方法。有鑒于此,二年多來(lái)我們?cè)跍y(cè)試方面做了一些探索,現(xiàn)在可以認(rèn)為;采用一般的CMC粘度測(cè)試法,以CMC的濃度— 粘度關(guān)系曲線作為對(duì)應(yīng),定出酶的活力計(jì)算單位。可以用作對(duì)酶商品的考核,現(xiàn)將具體內(nèi)容介紹如下;
1.2 CMC粘度法的檢測(cè)方法以及有關(guān)活力的概念
1.2.1 測(cè)試儀器與方法
使用儀器:NDJ-1Rotational Viscometer 上海天平儀器廠
計(jì)算公式:(1/V1-1/Vo)×1000/10(分鐘)
相對(duì)活力含義:在30℃水溶液中,一克酶作用于20克CMC,反應(yīng)十分鐘,相當(dāng)于有10克CMC水解時(shí),其相對(duì)活力為100。
1.2.2 具體操作
取醚化度為85%的CMC,加水制糊配成1%的溶液,取纖維素酶加水配成1克/升的溶液,HAC 0.2M三者按2∶1∶1混合(即15ml∶7.5ml∶7.5ml。中性酶則不加醋酸液,以水代之),在30℃條件下反應(yīng)十分鐘,在回轉(zhuǎn)式粘度計(jì)上,用轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)速6RPM,注入混合液20ml。
酶活=(1/V1-1/Vo)×10000/10(反應(yīng)時(shí)間“分”)
Vo=不加酶的CMC混合液粘度
V1=加酶后的CMC混合液粘度
1.2.3 CMC的濃度-粘度相關(guān)曲線(值)

計(jì)算:
粘度7.5時(shí),活力=(1/7.5-1/30)×10000/10=100
當(dāng)樣品混合液的粘度與CMC濃度減半時(shí)的數(shù)值相同時(shí),活力指標(biāo)即為100。
1.3測(cè)試數(shù)據(jù)(隨機(jī)采樣):
1996.1.4測(cè)定
1995.9.29測(cè)定
1995.6.28測(cè)定

1995.3.1測(cè)定

1993.10測(cè)定

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