2.9百合中總生物堿的含量測定取江蘇宜興、甘肅蘭州、浙江湖州和湖南龍山產地的百合飲片，分別按“2.2”項下方法制備供試品溶液，精密吸取供試品溶液3.0mL，置于分液漏斗中，按“2.4”項下方法操作，于414nm處依法測定吸光度。根據標準曲線計算百合總生物堿的含量，結果見表2。
3·討論
經查閱，2010版《中國藥典》中僅記載有百合藥材的鑒定方法，并未有其相關的定量指標。生物堿類成分是百合主要的抗腫瘤活性成分。然而，除了秋水仙堿外，百合中與秋水仙堿具有相同結構的卓酚酮類生物堿也具有較好的抗癌活性，且秋水仙堿在藥材中的含量低，若僅以秋水仙堿作為含量測定指標，并不能代表整個藥材的抗腫瘤活性成分。因此，選擇總生物堿為檢測指標，以秋水仙堿為對照品，采用酸性染料比色法測定百合中總生物堿的含量，從而建立百合含量測定指標。筆者運用此方法，對江蘇宜興、甘肅蘭州、浙江湖州和湖南龍山產地百合中的總生物堿分別進行了含量測定，由測定結果得知，百合總生物堿的含量在0.438%～0.749%，其中以甘肅蘭州產地居高，江蘇宜興最低。
酸性染料比色法是一種測定總生物堿含量的較好方法，靈敏度高，專屬性較好。酸性染料比色法對實驗條件的要求較為嚴格，選擇合適的測定條件是關鍵。在總生物堿含量測定時，緩沖溶液pH、酸性染料用量和氯仿用量是顯著的影響因素。本試驗分別考察了pH=3.2、3.4、3.6、3.8、4.0的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液、用量為3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL的酸性染料和用量為3.0、5.0、10.0、15.0、20.0mL的氯仿溶液對生物堿與酸性染料結合程度及其絡合物被萃取程度的影響。依據測定吸光度值的大小，最終確定緩沖溶液pH3.6、酸性染料用量5.0mL、氯仿用量10.0mL為酸性染料比色法測定百合總生物堿的最佳萃取顯色條件，并且在實驗過程中嚴禁在氯仿萃取液中混入水分，否則會使溶液變渾濁，影響比色結果。故在測定吸光度前，必須用脫水劑（如無水硫酸鈉）除去萃取溶劑中的水分。
此外，實驗中發現溴甲酚綠顯色劑放置一段時間后會不穩定，因此顯色劑應現用現配。從而可以保證測定結果準確、可靠、穩定。 在實驗過程中，以總生物堿的含量高低為指標，對百合中總生物堿的提取方法（包括乙醇回流、氯仿超聲、酸水超聲、酸水回流）進行了考察。經測定發現，采用酸水回流提取的方法，可使百合中的總生物堿成分提取完全，從而有利于百合充分發揮抗腫瘤的藥效。
4·參考文獻
[1]國家藥典委員會.中國藥典.一部.2010：123
[2]李天真.百合功能性因子的研究進展.食品科技，2007（7）：248第一作者：杜萌（1986-），碩士研究生，研究方向為中藥復方及新藥研究。
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