2.2漆酶的固定
漆酶固定工藝對(duì)固定化酶的催化活性有很大的決定作用.采用何種工藝進(jìn)行固定,除了酶的活力,還要考慮最終的催化效果、失活與再生能力、固定化試劑的毒性等因素,更重要的還取決于所使用的固定化載體材料.國內(nèi)外對(duì)漆酶固定的研究在近些年有不少報(bào)道,所采用的載體有殼聚糖[281、海藻酸鈉凝膠[291及PVAtol等,其中文獻(xiàn)[31]還對(duì)近幾十年來科研工作者利用不同支撐材料固定漆酶的研究成果進(jìn)行了綜述.
目前,固定化漆酶應(yīng)用較為成熟的是在廢水脫色[32-33]方面,因此對(duì)這方面研究中漆酶的固定做一簡要介紹.8印染助劑27卷A.Kunamneni等人[3211∞利用環(huán)氧基活化的聚甲基丙烯酸酯基聚合物為載體,將漆酶進(jìn)行共價(jià)固定的研究卓有成效,不但顯著提高了漆酶對(duì)pH、溫度、儲(chǔ)藏時(shí)間的穩(wěn)定性,而且重復(fù)利用17次之后酶活性仍保持在84%.他們將酶制劑DeniLiteIIS溶解于0.1mol/L醋酸鈉緩沖溶液(pH=4.51中,通過離心和過濾使之最終質(zhì)量濃度為5g/L,然后用1mol/L碳酸鈉緩沖溶液將其pH值調(diào)至9.0,放人載體[m(漆酶):m(載體)=1:1O,]于室溫下攪拌反應(yīng)24h,然后過濾,用0.1mol/L醋酸鈉緩沖溶液清洗,真空干燥即得.WANGPing等人[33]150先將漆酶包埋在與聚乙二醇混合的海藻酸鈉/明膠顆粒中(擠入到2.0%的CaC1溶液中,迅速成形),在4℃下與交聯(lián)劑戊二醛反應(yīng)2h,然后用0.1mol/L(pH=7.0)磷酸鹽緩沖溶液反復(fù)沖洗顆粒,干燥即得固定化酶.
2.3木聚糖酶的固定
朱啟忠等人曾嘗試采用殼聚糖、海藻酸鈉為載體,結(jié)合微膠囊技術(shù)對(duì)木聚糖酶進(jìn)行固定1,但是研究結(jié)果是酶固定率不太理想(39.4%).而采用共價(jià)結(jié)合法則可以進(jìn)一步提高酶活回收率,但是共價(jià)法通常需要通過接枝反應(yīng)在載體中引人具有可以與酶反應(yīng)的基團(tuán).最近A.Sarbu等人[35]通過自由基過氧化物的激發(fā)將丙烯酰胺接枝到醋酸纖維薄膜上,引入能夠與交聯(lián)劑反應(yīng)的一CONH,為獲得高酶活回收率的固定化木聚糖酶提供了可能.到目前為止,對(duì)木聚糖酶的固定研究還不多,其在工業(yè)中的應(yīng)用還有待研究.
3新型生物酶在漂白中的應(yīng)用
3.i葡萄糖氧化酶對(duì)棉織物的漂白
諸多研究表明:用葡萄糖氧化酶代替化學(xué)漂白劑來實(shí)現(xiàn)對(duì)棉織物的生物漂白處理應(yīng)用前景極好[3-4]不僅在紡織品的印染加工中有所應(yīng)用,還可將葡萄糖氧化酶加入到洗滌劑中制成日常的洗滌用品[361,對(duì)于咖啡、茶漬、紅酒等的去除有特殊效果.GOD對(duì)棉織物漂白通常以退漿f淀粉漿料=4%(ow1)]后廢液為原料,如果用淀粉酶退漿,則可以使淀粉分解為葡萄糖,可直接用于葡萄糖氧化酶的催化反應(yīng).葡萄糖氧化酶對(duì)棉織物的漂白一般分為:f1)在一定條件下用GOD催化葡萄糖氧化,產(chǎn)生足量的H202以滿足漂白的需要;(2)用產(chǎn)生的過氧化氫溶液進(jìn)行漂白處理.其中,如何保證產(chǎn)生足量的H2o是整個(gè)應(yīng)用過程的關(guān)鍵.P.Anis等人I7187~8通過研究影響產(chǎn)生HO量的因素(如GOD用量、pH值、溫度、處理時(shí)間、葡萄糖用量)得出了最佳工藝:pH4.1(醋酸調(diào)節(jié))、GOD[酶活10U/g,用量0.O1%(owf)1、55℃處理45min、葡萄糖用量4024mg/L.采用此法產(chǎn)生的H202質(zhì)量濃度為800~1000mg/L.T.Tzanov等人在研究中還發(fā)現(xiàn),通風(fēng)條件對(duì)過氧化氫的產(chǎn)量起著很關(guān)鍵的作用[313,因?yàn)樵诜磻?yīng)過程中需要有氧氣的參與.在對(duì)漂白應(yīng)用的研究方面,通過對(duì)酶法漂白和傳統(tǒng)化學(xué)試劑漂白效果的比較,以CIE白度為指標(biāo),得出了合理的漂白工藝,結(jié)果如表1所示.
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