酶與織物之間的作用時(shí)間是非常關(guān)鍵的因素。時(shí)間過短，拋光處理效果不好；時(shí)間過長，織物則有較大的強(qiáng)力損失。將酶促反應(yīng)中吸光度對時(shí)間作圖，得到酶反應(yīng)的速率曲線，見圖3。
從圖3可以看出，反應(yīng)時(shí)間為60min時(shí)，酶反應(yīng)速率最大，之后吸光度基本保持不變，說明60min左右即可基本反應(yīng)完全。這是由于DNS是一種氧化劑，能與還原糖作用使硝基顯橙色，在一定的還原糖濃度范圍內(nèi)，橙色深度與還原糖濃度成正比，即反應(yīng)液的吸光度與葡萄糖濃度成正比，當(dāng)酶催化分解纖維素時(shí)產(chǎn)生的還原糖全部參與反應(yīng)后，溶液顏色將不再加深。
最佳處理時(shí)間取決于機(jī)械沖擊力程度和其它工藝條件對酶的最佳適用范圍的影響。機(jī)械沖擊力越高，其它工藝參數(shù)越佳，酶催化處理所需的時(shí)間就越短。根據(jù)工廠實(shí)際工藝情況，一般酶催化作用時(shí)間可選擇30～60min。
3．1．5標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立
分別移取定量的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和蒸餾水，加入2mLDNS顯色劑，按照1．4測定酶活，讀取不同濃度下的吸光度值，作出吸光度一濃度曲線，如圖4。
由圖4知，當(dāng)葡萄糖的濃度在0～7．2umol／mL時(shí)，葡萄糖的量與吸光度成良好的線性關(guān)系，該標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為：Y=0．15066x一0．00875，線性相關(guān)系數(shù)R=0．99984。
3．1．6 TF一16l拋光酶酶活力測定
取一定量拋光酶TF一161稀釋至500mL，按照1．4測定酶活，結(jié)果如表2。
根據(jù)表2，稀釋液的吸光度在0．4～0．7時(shí)，誤差較小。但是，對其它不同菌種發(fā)酵的拋光酶液進(jìn)行測定發(fā)現(xiàn)，并不是每種纖維素拋光酶都適宜在該范圍內(nèi)測定。綜合考慮酶的適用范圍以及儀器誤差等，選擇吸光度在0．3～0．4的酶液測定酶活較為合適。
3．2拋光酶TF·161的應(yīng)用
3．2．1拋光酶一161應(yīng)用工藝及拋光效果
拋光整理是利用拋光酶先弱化纖維末端，再通過機(jī)械作用使其與紗分離，從而賦予織物持久的拋光效果和抗起毛起球效果。根據(jù)2．3工藝處方(pH值5．0～5．5)對棉織物進(jìn)行拋光整理。通過對比拋光前后的織物圖片，考察拋光酶的拋光效果，如圖5。
由圖5可以看出，織物拋光后，表面茸毛明顯減少，更加光潔；觀察還發(fā)現(xiàn)，染色后織物的色澤更加鮮亮，僅有極小色變。根據(jù)工廠實(shí)際應(yīng)用情況，為了避免色光的偏差，一般采用先拋光后染色的加工工藝。
拋光酶具有較好的拋光效果，但是其對反應(yīng)條件和應(yīng)用工藝較敏感，拋光酶用量、工作液的pH值、溫度和時(shí)間等因素對拋光效果影響都較大。
3．2．2拋光酶用量的影響
在機(jī)械作用程度相同時(shí)，拋光酶的用量越高，酶催化水解速率也越高。為了能夠使織物的水解控制在一定范圍內(nèi)，需按機(jī)械沖擊力調(diào)節(jié)酶的用量。對于厚織物或人造纖維素織物等，采用“分段投料法”更為有效，即先投入1／2用量的酶制劑，在整理進(jìn)行到一半時(shí)再投入另1／2用量的酶制劑』。拋光酶用量過多，會(huì)對織物造成過大的強(qiáng)損；用量過少，則不能起到較好的拋光效果。考慮到織物強(qiáng)力損失以及重量損失的因素，在實(shí)際應(yīng)用中，按2．3工藝處方(pH值5．0，溫度55℃，拋光反應(yīng)時(shí)間30min)，考察酶用量與強(qiáng)力損失和重量損失的關(guān)系，見圖6和圖7。
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