胰酶是哺乳動物胰臟中提取的多種混合物,其主要成分為胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶。目前在棉布紡織退漿過程中,使用BF一765淀粉酶胰酶退漿會使棉織物產生陰紋。因此,常常用胰酶代替BF一765淀粉酶作為退漿劑使用。由于經紗上漿的漿液主要成分為a一淀粉、牛油等 ,所以紡織企業中所需的胰酶粉的主要成分與其它工業部門有所不同,其主要需要胰淀粉酶具有高活力,而對胰蛋白酶的活力要求不高。目前,國內外主要采用醇酮法提取胰酶,這種工藝對淀粉酶的活性損失較大,試劑易燃有毒,環境污染嚴重,生產成本較高。因此,本著為企業服務的目的,對目前國內流行的胰酶工藝進行改進,使其既注重環保,又符合紡織企業生產的工藝要求。這對擴大胰酶的應用,提高豬胰臟的資源利用率,減少環境污染都有重要意義。
1 實 驗
1.1 儀器765M紫外可見分光光度計,上海精密科學儀器有限公司:PHS一3C型pH計,上海精密科學儀器有限公司;冰箱,青島海爾集團;LD一2A醫用離心機,蘇州醫用離心機廠:絞肉機,鹽城紅星機械廠; 電吹風機。
1.2 試劑
酪蛋白,供胰酶測定淀粉專用;胰酶粉,馬鈴薯淀粉,生化試劑;乙醚,異丙醇,鹽酸,氯化鈣,均為分析純。
1.3 實驗材料
豬胰臟、十二指腸,由鹽城肉聯廠提供。
1.4 酶的活性測定
胰淀粉酶,胰脂肪酶以及胰蛋白酶的活力測定和熾灼殘渣,干燥失重均按2000年《中國藥典》方法進行測定。
1.5 工藝流程
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2 結果分析
2.1 不同激活劑對胰酶活力的影響
目前,國內外一般采用加入1—1.5倍的25%乙醇,用1:1鹽酸調節pH值5—6,加入Ca2+ 激活劑對胰漿激活。此法較注重蛋白酶的活力的提高,而疏忽了對脂肪酶和淀粉酶的活性保護,尤其對脂肪酶破壞較大。因此,本法采用20% 的異丙醇來代替25% 乙醇,以減少對脂肪酶的破壞并在提取后回收異丙醇減少對環境的破壞;用十二指腸和胰酶粉作為激活劑,在
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2.2 不同沉淀劑對胰酶活力的影響
本工藝采用殼聚糖作為蛋白質沉淀劑來沉淀胰酶 ]。將活化胰液加入殼聚糖濃度為0.2%。并在 10%,pH=3.0的條件下靜置18h。在相同靜置時間和溫度條件下,和乙醇沉淀法及丙酮沉淀法相比較。結果見表2。
結果表明,本工藝利用殼聚糖作為沉淀劑,得到的胰淀粉酶的活力較前兩種有明顯提高。而且,不使用大量的有機試劑,減少了對環境的污染。而且殼聚糖不需要回收處理,大大降低了生產成本。有很好的經濟效益和環境效益。
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2.3 不同沉淀溫度對胰酶活力的影響
把活化的胰液在5、10、15、20%下各加入殼聚糖使其濃度達到0.2%,靜置18h,檢測三酶活力和酶的收率,結果見表3。
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由表3可以看出,低溫條件下有利于胰酶的沉淀,而且酶活力較高,考慮到實際情況和操作上的可行性,采用在10%條件下沉淀胰酶蛋白。此條件下提取,可使蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活力比為1:18:7。
3 優化工藝條件下生產胰酶實驗
按上面的改進工藝進行胰酶粉生產。平行三組,結果見表4。
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從表4可以看出,用本工藝生產胰酶粉,產品質量穩定。按干燥品計算每克胰酶粉中的淀粉酶活力平均達到92244個單位,熾燒殘渣為4.79%收率達到12.7%。這是一項較理想的生產技術。
4 結 論
本文對從豬胰中提取胰酶的工藝進行探討,確定紡織企業所需的生產工藝條件為:使用十二指腸和胰酶粉作為激活劑,質量分數為0.2%殼聚糖作為沉淀劑,在10℃條件下沉淀胰酶。得到胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力比為1:16:30,收率為 12%左右的胰酶粉。
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