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分光光度法(仲裁法)

8 原理 在催化劑存在下,用硫酸裂解淀粉及其衍生物,然后堿化反應產物,并進行蒸餾使氨 釋放,同時用硫酸溶液收集,再加入奈氏試劑,用分光光度計測定銨鹽,并轉化成氮含量。

9 試劑 在測定過程中,只可使用分析純的試劑和蒸餾水,或至少純度相當的水。 9.1 濃硫酸:96%(m/m)、ρ20為1.84g/mL。 9.2 氫氧化鈉溶液:40%(m/m)、ρ20為1.43g/mL。 9.3 催化劑:由97g硫酸鉀和3g無水硫酸銅組成。 9.4 硫酸銨。 9.5 硫酸:約0.1mol/L的標定溶液。 9.6 奈氏試劑:至少在使用前二天配備,將100g碘化汞(Ⅱ)和70g碘化鉀溶于100mL水中,另將244g氫氧化鉀溶于內有700mL水的1000mL容量瓶中,并使之冷卻至室溫。將上述碘化汞(Ⅱ)／碘化鉀溶液慢慢注入容量瓶中,邊注加邊搖蕩,加水至刻度,搖勻,放置至少2天,試劑應保存在棕色玻璃瓶內,置于暗處。

10 儀器 普通實驗室儀器,特別需要的有:10.1 凱氏燒瓶:容量一般為500～800mL之間。 10.2 消化架:能使凱氏燒瓶以傾斜位置加熱,并且僅使液面以下的瓶壁受熱。 10.3 排氣裝置:能使凱氏燒瓶內溶液在消化時,有害氣體不彌漫在室內。 10.4 凱氏定氮蒸餾裝置:由抽空蒸餾瓶、蒸汽容入管、冷凝管、小漏斗、1000mL圓底燒瓶組成。 10.5 錐形瓶:容量為100mL。 10.6 容量瓶:容量為200mL。 10.7 吸管:容量適當。 10.8 分光光度計:能被調至430nm波長,并備有適當的比色皿。其光路長度應在測定報告 中說明。 10.9 研缽。 10.10 篩子:篩眼孔徑為0.6mm。 10.11 分析天平。

11 分析步驟 11.1 樣品的準備 所測樣品應充分混合,放在密封干燥的容器內。對葡萄糖漿,在混合前應先除去表層約5mm。 對塊狀樣品必